c-Mpl新型剪切体c-Mpl-D在急性髓系白血病中的表达与功能

王家胜; 李飞; 何越; 吴乐燕; 李春谋; 曾茂桢; 陈俊汝; 陈海生; 郭琪琪; 范加希; 王淇; 黄萱; 陈伟庭; 张擎

doi:10.13471/j.cnki.acta.snus.ZR20240274

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

c-Mpl新型剪切体c-Mpl-D在急性髓系白血病中的表达与功能

研究论文 | 更新时间：2025-11-14

- c-Mpl新型剪切体c-Mpl-D在急性髓系白血病中的表达与功能
- Expression and functional analysis of the novel c-Mpl splice variant c-Mpl-D in acute myeloid leukemia
- 中山大学学报(自然科学版)(中英文) 2025年64卷第3期页码：47-59
- 作者机构：
  
  1.嘉应学院生命科学学院，广东梅州 514015
  2.中山大学生命科学学院，广东广州 510275
  3.中山大学附属第七医院，广东深圳 518107
  4.中山大学深圳研究院，广东深圳 518057
- 作者简介：
  
  王家胜（1986年生），男；研究方向：肿瘤生物学；E-mail：wangjsh55@mail.sysu.edu.cn
  李飞（1992年生），男；研究方向：肿瘤生物学；E-mail：lifei67@mail.sysu.edu.cn
  何越（1994年生），男；研究方向：分子药理学；E-mail：heyue35@mail2.sysu.edu.cn （
  陈伟庭（1978年生），男；研究方向：动物生理学；E-mail：chenwt@jyu.edu.cn
  张擎（1966年生），男；研究方向：分子药理学；E-mail：sszq@mail.sysu.edu.cn
- 基金信息：
  
  国家自然科学基金(82273467);嘉应学院人才启动项目(323E0467);深圳市科技创新委会基础研究计划(JCYJ20210324120812035);中山大学中央高校基本科研业务费(24qnpy180)
- DOI：10.13471/j.cnki.acta.snus.ZR20240274
  中图分类号： Q461;Q254;Q754
- 收稿：2024-09-05，
  
  录用：2024-11-27，
  
  网络出版：2025-01-23，
  
  纸质出版：2025-05-25
- 稿件说明：
移动端阅览
王家胜,李飞,何越等.c-Mpl新型剪切体c-Mpl-D在急性髓系白血病中的表达与功能[J].中山大学学报(自然科学版)(中英文),2025,64(03):47-59.

WANG Jiasheng,LI Fei,HE Yue,et al.Expression and functional analysis of the novel c-Mpl splice variant c-Mpl-D in acute myeloid leukemia[J].Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni,2025,64(03):47-59.
王家胜,李飞,何越等.c-Mpl新型剪切体c-Mpl-D在急性髓系白血病中的表达与功能[J].中山大学学报(自然科学版)(中英文),2025,64(03):47-59. DOI： 10.13471/j.cnki.acta.snus.ZR20240274.

WANG Jiasheng,LI Fei,HE Yue,et al.Expression and functional analysis of the novel c-Mpl splice variant c-Mpl-D in acute myeloid leukemia[J].Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni,2025,64(03):47-59. DOI： 10.13471/j.cnki.acta.snus.ZR20240274.

摘要

促血小板生成素（TPO，thrombopoietin）通过其受体c-Mpl调控巨核细胞发育以及促进血小板生成，与多种肿瘤预后和生存有负相关性，这与循环TPO的内化降解及c-Mpl可变剪接体c-Mpl-D内吞有关。本研究首先用逆转录表达系统构建了UT-7/c-Mpl-D稳定系细胞以研究c-Mpl-D单独存在情况下的功能，通过电转的方式构建了Dami/c-Mpl-D稳定系细胞，进而研究c-Mpl-D对c-Mpl-F功能的调控，进一步通过交联剂与免疫共沉淀研究c-Mpl-D与TPO的相互作用。结果表明，当c-Mpl-D与c-Mpl-F共存时，c-Mpl-D可促进Dami细胞增殖，抑制Dami细胞凋亡，阻止Dami细胞往巨核细胞方向成熟。同时，c-Mpl-D在细胞中TPO刺激后显著降低了受体内化效应。综上所述，本研究提出了随巨核细胞分化成熟c-Mpl-D表达量不断上升相关生理意义的模型，为c-Mpl-D和巨核细胞增殖分化的关系提供了新的认识，为巨核细胞增殖分化机制的分析提供了新的实验依据，有助于与c-Mpl-D相关病症的预防、诊断及治疗。

Abstract

Thrombopoietin （TPO） regulates the development of megakaryocytes and the production of platelets through its receptor c-Mpl， and has a negative correlation with the prognosis and survival of various tumors， which is related to the internalization and degradation of circulating TPO and the endocytosis of the c-Mpl splice variant c-Mpl-D. This study constructed a UT-7/c-Mpl-D stable cell line using a reverse transcription expression system to study the function of c-Mpl-D in isolation. A Dami/c-Mpl-D stable cell line was also constructed by electroporation to investigate the regulatory effect of c-Mpl-D on c-Mpl-F function. Further， the interaction between c-Mpl-D and TPO was studied using crosslinking and immunoprecipitation. The results indicated that， when coexisting with c-Mpl-F， c-Mpl-D can promote Dami cell proliferation， inhibit Dami cell apoptosis， and prevent Dami cells from maturing towards megakaryocytes. Additionally， c-Mpl-D significantly reduced the receptor internalization effect after TPO stimulation. In summary， this study proposes a model related to the physiological significance of the increasing expression of c-Mpl-D with the differentiation and maturation of megakaryocytes， providing new insights into the relationship between c-Mpl-D and the proliferation and differentiation of megakaryocytes. It offers new experimental evidences for the analysis of the mechanisms of megakaryocyte proliferation and differentiation， and promotes the prevention， diagnosis， and treatment of c-Mpl-D-related diseases.

关键词

Keywords

references

ALEXANDER W ， METCALF D ， DUNN A ， 1995 . Point mutations within a dimer interface homology domain of c-Mpl induce constitutive receptor activity and tumorigenicity ［J］. EMBO J ， 14 （ 22 ）： 556 - 559 .

BROOK R ， WANG J ， BARIT D ， et al ， 2024 . Spontaneous bleeding in chronic kidney disease： Global coagulation assays may predict bleeding risk ［J］. Res Pract Thromb Hae ， 8 （ 5 ）： 102520 .

CHANG M ， SUEN Y ， MENG G ， et al ， 1996 . Differential mechanisms in the regulation of endogenous levels of thrombopoietin and interleukin-11 during thrombocytopenia： Insight into the regulation of platelet production ［J］. Blood ， 88 （ 9 ）： 3354 - 3362 .

CHEN J ， HERCEG-HARJACEK L ， GROOPMAN J E ， et al ， 1995 . Thrombopoietin serum concentration in patients with reactive and myeloproliferative thrombocytosis ［J］. Blood ， 86 （ 11 ）： 4054 - 4062 .

de SAUVAGE F J ， CARVER-MOORE K ， LUOH S M ， et al ， 1996 . Physiological regulation of early and late stages of megakaryocytopoiesis by thrombopoietin ［J］. J Exp Med ， 183 （ 2 ）： 651 - 656 .

DEUTSCH V R ， TOMER A ， 2006 . Megakaryocyte development and platelet production ［J］. Brit J Haematol ， 134 （ 5 ）： 453 - 466 .

DING J ， KOMATSU H ， IIDA S ， et al ， 2009 . The Asn505 mutation of the c-MPL gene， which causes familial essential thrombocythemia， induces autonomous homodimerization of the c-Mpl protein due to strong amino acid polarity ［J］. Blood ， 114 （ 15 ）： 3325 - 3328 .

GAY L J ， FELDING-HABERMANNN B ， 2011 . Contribution of platelets to tumour metastasis ［J］. Nat Rev Cancer ， 11 （ 2 ）： 123 - 134 .

GNRNEY A ， CARVER MOORE K ， de SAUVAGE F ， et al ， 1994 . Thrombocytopenia in c-mpl-deficient mice ［J］. Science ， 265 （ 5177 ）： 1445 - 1447 .

GREENBERG S M ， ROSENTHAL D S ， GREELEY T A ， et al ， 1988 . Characterization of a new megakaryocytic cell line： The Dami cell ［J］. Blood ， 72 （ 6 ）： 1968 - 1977 .

KAUSHANSKY A ， KAUSHANSKY K ， 2014 . Systems biology of megakaryocytes ［J］. Adv Exp Med Biol ， 844 ： 59 - 84 .

KAUSHANSKY K ， 1995 . Thrombopoietin： the primary regulator of megakaryocyte and platelet production ［J］. Thromb Haemostasis ， 74 （ 1 ）： 521 - 525 .

KAUSHANSKY K ， 2024 . Thrombopoietin， the primary regulator of platelet production： From mythos to logos， a thirty-year journey ［J］. Biomolecules ， 14 （ 4 ）： 489 .

KAUSHANSKY K ， LOK S ， HOLLY R ， et al ， 1994 . Promotion of megakaryocyte progenitor expansion and differentiation by the c-Mpl ligand thrombopoietin ［J］. Nature ， 369 （ 6481 ）： 568 - 579 .

KOMATSU N ， YAMAMOTO M ， FUJITA H ， et al ， 1993 . Establishment and characterization of an erythropoietin-dependent subline， UT-7/Epo， derived from human leukemia cell line， UT-7 ［J］. Blood ， 82 （ 2 ）： 456 - 464 .

LI J ， SABATH D F ， KUTER D J ， 2000 . Cloning and functional characterization of a novel c-mpl variant expressed in human CD34 cells and platelets ［J］. Cytokine ， 12 （ 7 ）： 835 - 844 .

LI J ， XIA Y ， KUTER D J ， 1999 . Interaction of thrombopoietin with the platelet c‐mpl receptor in plasma： binding， internalization， stability and pharmacokinetics ［J］. Brit J Haematol ， 106 （ 2 ）： 345 - 356 .

LIU X G ， HOU Y ， HOU M ， 2023 . How we treat primary immune thrombocytopenia in adults ［J］. J Hematol Oncol ， 16 （ 1 ）： 4 .

MÄRKLIN M ， TANDLER C ， KOPP H G ， et al ， 2020 . C-Cbl regulates c-MPL receptor trafficking and its internalization ［J］. J Cell Mol Med ， 24 （ 21 ）： 12491 - 12503 .

MILLOT G A ， FEGER F ， GAR O L ， et al ， 2002 . Mpl K， a natural variant of the thrombopoietin receptor with a truncated cytoplasmic domain， binds thrombopoietin but does not interfere with thrombopoietin-mediated cell growth ［J］. Exp Haematol ， 30 （ 2 ）： 166 - 175 .

ORSINI S ， NORIS P ， BURY L ， et al ， 2017 . Bleeding risk of surgery and its prevention in patients with inherited platelet disorders ［J］. Haematologica ， 102 （ 7 ）： 1192 - 1203 .

PHILIP R ， FRANK L ， KATHARINA G ， et al ， 2018 . Immature platelet fraction and thrombopoietin in patients with liver cirrhosis： A cohort study ［J］. PLoS One ， 13 （ 2 ）： e0192271 .

SHIVDASANI R A ， FIELDER P ， KELLER G A ， et al ， 1997 . Regulation of the serum concentration of thrombopoietin in thrombocytopenic NF-E2 knockout mice ［J］. Blood ， 90 （ 5 ）： 1821 - 1827 .

van der VUURST H ， van WILLIGEN G ， van SPRONSEN A ， et al ， 1997 . Signal transduction through trimeric G proteins in megakaryoblastic cell lines ［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol ， 17 （ 9 ）： 1830 - 1836 .

VINCENT J ， ALISON R ， EDWARD F ， et al ， 2021 . Clinical applications of thrombopoietin silencing： A possible therapeutic role in COVID-19？［J］. Cytokine ， 146 ： 155634 .

WANG Q ， SUN R ， WU L ， et al ， 2013 . Identification and characterization of an alternative splice variant of Mpl with a high affinity for TPO and its activation of ERK1/2 signaling ［J］. Int J Biochem Cell Biol ， 45 （ 12 ）： 2852 - 2863 .

ZOU Z ， FAN X ， LIU Y ， et al ， 2020 . Endogenous thrombopoietin promotes non-small-cell lung carcinoma cell proliferation and migration by regulating EGFR signalling ［J］. J Cell Mol Med ， 24 （ 12 ）： 6644 - 6657 .

浏览量

下载量

CSCD

文章被引用时，请邮件提醒。

提交

工具集

关联资源

暂无数据