用加端PCR技术改造h－IGF－1cDNA

罗进贤; 吉坤美; 张添元; 王红革

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用加端PCR技术改造h－IGF－1cDNA

论文 | 更新时间：2023-12-11

- 用加端PCR技术改造h－IGF－1cDNA
- Amplification of hIGF-1 Coding Sequence by PCR Technique
- 中山大学学报(自然科学版)(中英文) 1996年35卷第2期页码：79-83
- 作者机构：
  
  中山大学生命科学学院
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：
  中图分类号：
- 纸质出版日期：1996，
  
  网络出版日期：1996-2-25，
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罗进贤, 吉坤美, 张添元, 等. 用加端PCR技术改造h－IGF－1cDNA[J]. 中山大学学报(自然科学版)(中英文), 1996,35(2):79-83.

Luo Jinxian, Ji Kunmei, Zhang Tianyuan, et al. Amplification of hIGF-1 Coding Sequence by PCR Technique[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunYatseni, 1996,35(2):79-83.
罗进贤, 吉坤美, 张添元, 等. 用加端PCR技术改造h－IGF－1cDNA[J]. 中山大学学报(自然科学版)(中英文), 1996,35(2):79-83. DOI：

Luo Jinxian, Ji Kunmei, Zhang Tianyuan, et al. Amplification of hIGF-1 Coding Sequence by PCR Technique[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis SunYatseni, 1996,35(2):79-83. DOI：

摘要

用ＤＮＡ合成仪合成了分别带有ＰｓｔＩ位点和ＳａｌＩ位点及终止密码子的２个用于扩增ｈＩＧＦ－１ｃＤＮＡ的ＰＣＲ引物．利用合成的引物，７００ｂｐ长的ｈＩＧＦ－１ｃＤＮＡ模板和Ｔａｑ聚合酶进行ＰＣＲ扩增．扩增产物经电泳鉴定后克隆进Ｍ１３ｍｐ１８载体，进行核苷酸序列分析．结果显示：ＰＣＲ产物含已发表的ｈＩＧＦ－１成熟蛋白的编码序列和５＇端的ＰＳｔＩ位点及３＇端的ＳａｉＩ位点及终止密码ＴＡＧ．用加端ＰＣＲ技术成功地扩增和改造了ｈＩＧＦ－１的编码序列．

Abstract

Two primers containing the Pst I site and Sal I site and stop codon respectively were synthesized and used to amplify a 232 hp DNA sequence coding for mature hIGF-1 protein with the 700 bp hIGF-1 cDNA fragment as template by Taq polymerase.The amplified DNA fragment was cloned into M13mp18 vector and sequenced by Sanger-s dideoxy chain termination method. The sequencing data show that the nucleotide sequence of the cloned fragment is the same as hIGF-1 coding sequence published and that we have successfully remoulded the hIGF-1 protein coding region with Pst I site at 5’ end and Sal I site and stop codon at 3’ end using the add-on PCR technique.

关键词

PCR技术hIGFcDNA改造

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