Prétraitement des échantillons de liposomes et d'exosomes pour la microscopie électronique en transmission et observation morphologique

GUO Linna ,  

YU Yuanyuan ,  

ZHENG Chunxiong ,  

LIANG Chaolun ,  

摘要

Optimisation des conditions de prétraitement des échantillons de liposomes et d'exosomes de cellules de cancer du pancréas pour la microscopie électronique en transmission (MET, transmission electron microscopy), afin d'améliorer la qualité des images au MET et de préserver l'intégrité structurelle des échantillons. Afin de résoudre les problèmes de faible contraste et de fragilité structurelle des liposomes et exosomes lors de l'imagerie au MET, une série de méthodes expérimentales de prétraitement des échantillons ont été systématiquement explorées, incluant le dépoussiérage par filtre membranaire, la purification sur colonne de gel d'agarose, la coloration négative au phosphotungstique, le séchage par chauffage sous vide, et la dilution de la concentration d'extrait. L'observation en microscopie électronique en transmission a permis d'analyser les caractéristiques morphologiques des liposomes et exosomes sous différentes conditions expérimentales et de discuter leur impact sur la qualité des images MET, fournissant ainsi une référence pour obtenir une observation structurale morphologique MET plus fidèle, fiable et adaptée aux exigences analytiques. Les résultats montrent qu'en comparaison à la méthode classique de coloration négative au phosphotungstique, les images des liposomes sont améliorées après dépoussiérage par filtre membranaire et purification par colonne de gel. Pour les échantillons d'exosomes, l'optimisation du temps de coloration au phosphotungstique et de la concentration de l'échantillon conduit à une distribution uniforme des tailles et à des caractéristiques morphologiques distinctes.

关键词

liposomes;exosomes;microscopie électronique en transmission;caractéristiques morphologiques;m éthodes de prétraitement

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